Je reconnus que l'intensité colorante reste, entre d'assez larges limites, proportionnelle à la dilution si au lieu de diluer avec de l'eau on dilue avec une solution de sulfocyanate au même titre ; en outre, si la réaction de la liqueur est dès le début assez fortement acide, par HCl ou SO4H2, un excès plus ou moins grand du même acide ne change rien à la coloration ; enfin, je vérifiai que les différents sels, bases et acides qui peuvent se trouver dans les liqueurs provenant des tissus animaux n'ont aucune influence, sauf l'acide phosphorique, à partir d'une certaine proportion que j'ai déterminée exactement. La colorimétrie en général, à la suite de quelques applications maladroites, était fort en défaveur ; j'ai étudié méthodiquement la façon dont il faut l'employer pour qu'elle mérite confiance.
Il existe divers colorimètres : l'opération essentielle consiste toujours à comparer la coloration de deux portions du champ visuel ramenées côte à côte par l'appareil et à établir l'égalité de teinte en faisant varier l'épaisseur de la solution colorée ; de cette épaisseur, on déduit l'intensité colorante. Or, notre oeil perçoit assez grossièrement les différences d'intensité dans un ton un peu foncé ; il est au contraire fort sensible à une modification de nuance, à un virage. Mais, pour une matière colorante donnée, il y a lieu de chercher, pour en faire la colorimétrie, une teinte sensible qui existe en général. Pour le sulfocyanate ferrique en particulier, lorsqu'il est vu en couche mince, il est jaune pâle ; lorsqu'on fait croître l'épaisseur, avant que d'arriver à sa couleur sang bien connue, il passe par une teinte orangée qui, pour un faible changement d'épaisseur, vire d'une façon très sensible vers le jaune ou vers le rouge. On doit chercher cette nuance, et, pour avoir toujours la même sensibilité, la repérer au moyen d'un étalon fixe, en verre coloré. La lumière doit être constante comme qualité et comme direction : il faut donc opérer à la chambre noire, avec une source de lumière artificielle, fixée d'une manière immuable par rapport à l'appareil. En outre, il faut toujours se servir de colorimètre comme on fait de la balance dans le procédé de la double pesée : la liqueur titrée et la liqueur à titrer seront mises successivement du même côté du colorimètre, et prises chacune sous l'épaisseur nécessaire pour donner l'égalité de coloration avec l'étalon de verre placé de l'autre côté. Enfin, pour passer des épaisseurs lues à l'intensité colorante cherchée, on peut appliquer la simple règle de proportion, à la condition que ces épaisseurs soient voisines, c'est-à-dire que l'intensité colorante de la liqueur à titrer soit voisine de celle de la liqueur titrée.
Moyennant ces conditions, on peut reconnaître une variation de un cinquantième de la teneur en fer d'une solution donnée ; comme on peut opérer avec une quantité totale bien inférieure à 1 milligramme de Fe, on atteint facilement un centième de milligramme. Reste à obtenir, à partir des organes, la liqueur propre à la colorimétrie ;
